不想挑晶体？原位晶体筛选，测试和结构解析方法

  X射线晶体衍射仪经历了快速发展的10年，我们的光源越来越强，探测器越来越快，数据处理越来越智能。仪器的进步，大大提高了我们的晶体数据收集的效率和成功率，让我们有更多的时间研究更深入的问题。然而好的晶体永远都是一位的尤其对于蛋白质晶体来说，获得能够衍射的晶体，仍然是主要的瓶颈之一。通常，为了检验蛋白质晶体的衍射质量，我们需要从晶体板上挑出晶体，加上防冻剂，冷冻，放到衍射仪上，然后测试。然而所有这些步骤都有可能损坏晶体。低温晶体筛选不仅耗时耗力，而且我们没有办法避免这些操作过程对晶体衍射质量的影响。

  几年前，在同步辐射出现了原位晶体学的方法：快速，方便，可以直接在晶体生长环境下研究晶体的衍射。原位的方法避免了低温晶体学在晶体转移过程中对晶体的损害。同样在室内衍射仪上，Bruker D8 VENTURE-ISX STAGE同样完美地实现了原位晶体筛选评估：

  1.切换方便，5分钟内即可完成样品台的安装和拆卸

  2.软件控制，只需要鼠标点击即可快速对整个晶体板的每个结晶空进行查看

  3.自动多样品队列衍射实验

  4.快速表征晶胞参数，识别晶体以及后续的数据收集

 ▲ ISX Stage mounted on D8 VENTURE

实验案例：GlucoseIsomerases晶体筛选和测试

仪器配置：D8VENTURE IµS 3.0，PHOTONII，ISX STAGE

样品：GlucoseIsomerases结晶初筛48孔板，96个drop

总时间：1h（查看96个drop：30min；衍射28个晶体：30min；晶胞表征：10min）

1

晶体查看，挑选

 ▲ ISX Stage Software Control

2

确定晶体筛选队列

 ▲ 挑选用于自动筛选的晶体

3

自动队列晶体衍射实验

 ▲ 30min，6个孔，28个晶体样品筛选结果

4

数据收集

室温下，原位对4颗晶体进行数据收集，然后合并数据，使用MR解析结构。

 ▲ 原位常温数据采集和结构解析